神秘的糖丸

我国著名医学科学家、病毒学专家顾方舟， 他是孩子们口中的“糖丸爷爷” 是他不惜用自己和刚满月的孩子试药， 终于用一剂疫苗“庇佑”了三代中国人，这神秘的糖丸，给了我们最甜的童年，1962年糖丸——脊髓灰质炎减毒活疫苗研制成功。

图1：糖丸——脊髓灰质炎减毒活疫苗（图来源搜狗图片）

(资料图片)

脊髓灰质炎疫苗（Poliovirus Vaccines）是预防和消灭脊髓灰质炎的有效手段。脊髓灰质炎是由脊髓灰质炎病毒引起的一种急性传染病。临床表现主要以发热、上呼吸道症状、肢体疼痛为主。病毒主要侵犯人体脊髓灰质前角的灰、白质部分，对灰质造成永久性损害，出现肢体弛缓性麻痹。部分患者可发生迟缓性神经麻痹并留下瘫痪后遗症，一般多见于5岁以下小儿，故俗称“小儿麻痹症”。

用来预防脊髓灰质炎的疫苗有两类：口服脊灰减毒活疫苗（OPV）、注射型脊灰灭活疫苗（IPV，包括含IPV成分的联合疫苗）。

脊髓灰质炎疫苗发展大记事

1936年时，纽约大学的 Maurice Brodie 利用猴子的脊髓作为病毒生长环境，并以甲醛杀死病毒，以制成脊髓灰质炎疫苗。

1948年，由约翰·富兰克林·恩德斯所领导的波士顿儿童医院团队，在实验室的人体组织中成功培养出脊髓灰质炎病毒。

1952年匹兹堡大学的约纳斯·沙克利用3种血清型的致病性病毒株，首先将这些病毒培养于 Vero cell 的猴子肾脏组织，之后再以福马林处理使其失去活性制备而成，这种疫苗称为“去活化脊髓灰质炎疫苗”（inactivated poliovirus vaccine，IPV），又称“沙克疫苗”，此疫苗于1955年获得FDA上市许可。

1957年由美国医学家阿尔伯特·沙宾发明了口服脊髓灰质炎疫苗（Oral polio vaccine, OPV），并于1961年在美国获批准上市。目前广泛使用口服（减毒）脊髓灰质炎疫苗（OPV）。

我国脊髓灰质炎疫苗

1958年，我国病毒学家顾方舟团队首次分离出“脊灰”病毒，为免疫方案提供了科学依据。1959年，我国成功研制出首批“脊灰”活疫苗，1962年研制成功糖丸减毒活疫苗。“糖丸”将不易贮存的液体疫苗转化为固体，大大延长了保存期，方便送往农村和偏远地区，能更大范围控制疾病风险。1962年我国自研“脊灰”活疫苗在昆明中国医学科学院医学生物学研究所投产。

1971年选育出了中Ⅲ2株代替原来使用的SabinⅢ型毒种。1985年又成功研制出三价糖丸疫苗。

2015年1月14日，国家食品药品监管总局批准了，中国医学科学院医学生物学研究所研发的全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（单苗）的生产注册申请。该疫苗主要通过注射途径用于儿童预防脊髓灰质炎病毒的感染，不仅提高了疫苗接种的安全性，也打破了发达国家对脊髓灰质炎灭活疫苗生产的垄断。

2022年2月18日，世界卫生组织（WHO）正式宣布，国药集团中国生物北京生物制品研究所自主研发生产的Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（sIPV）通过世卫组织预认证。

脊髓灰质炎疫苗制备工艺

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗

1.细胞培养：Vero细胞是贴壁依赖型细胞，在反应器中大规模培养Vero要用微载体培养。

Vero细胞在两家不同批次微载体的培养基中，24h至96h细胞生长曲线如图1所示。

图1：蓝晓科技细胞培养微载体和进口微载体用于Vero细胞培养生长曲线

细胞生长情况观察

图2：蓝晓科技细胞培养微载体用于Vore细胞培养细胞生长情况观察

Seplife LX-MC-dex1微载体的应用领域非常广泛，基于微载体生产的疫苗除了新冠以外，还包括脊髓灰质炎、风疹、狂犬病、流感、日本脑炎（乙型脑炎）、呼吸道合胞病毒（RSV）和口蹄疫（FMD）疫苗等。与其他细胞培养工艺相比，微载体培养工艺可以提高产量，降低成本，并减少污染。

2.收获病毒，澄清，UF/DF，浓缩：略

3.层析纯化：浓度的病毒溶液先用Seplife 6FF凝胶过滤层析纯化，去除大于95%的HCP及HC-DNA，HC-RNA等杂质。凝胶过滤层析后在用DEAE Seplife FF或Seplife LXPM DEAE706M进一步精细纯化，去除痕量的杂质，即可完成纯化

4.调整浓度，病毒灭活，除菌过滤，制剂化：略。

参考资料

1. 一种制备脊髓灰质炎灭活疫苗的方法——专利公开号：CN 1647822A。

2.Introduction of Inactivated Poliovirus Vaccine and Switch from Trivalent to Bivalent Oral Poliovirus Vaccine - Worldwide, 2013-2016

3。Hamid Jafari, et al. Efficacy of inactivated poliovirus vaccine in India. Science, 22 August 2014; DOI:10.1126/science.1255006

4.中国生物官微。